• Противоопухолевые свойства полисахаридов, выделенных из грибов класса базидиомицетов — статья с адаптированным переводом.

• Mushrooms, Tumors, and Immunity (Грибы, опухоли и иммунитет). Библиография — 200 научных работ.

• Treatment of Cancer with Mushroom Products и гугл-перевод
• Отзывы о лечебных грибах

Противоопухолевое действие медицинских грибов — базидиомицетов

(состояние вопроса)

академик, д-р мед. наук, проф. Д.А. Путырский,

д-р мед. наук, проф. З.Ш. Голевцова,

д-р биол. наук, проф. Г.И. Кирьянов,

д-р биол. наук, проф. В.Ю. Поляков

Исследованием лечебных свойств грибов — базидиомицетов и их практическим применением в медицине активно занимаются ученые ряда стран на протяжении многих лет.
Базидиомицеты обладают выраженными адаптогенными свойствами. В связи с важностью активных веществ из высших грибов для здоровья человека, в последние годы эти грибы называют медицинскими или лекарственными.
Медицинские грибы содержат полноценный комплекс биологически активных веществ: иммунномодулирующие и противоопухолевые полисахариды; коэнзим Q10 (убихинон) — необходимое вещество для работы сердца и печени; набор необходимых организму витаминов: бета-каротин, витамин Е, витамины группы В и др. В состав высших грибов входят незаменимые аминокислоты и питательные белки, большая группа ферментов, эссенциальные жирные кислоты и фосфолипиды, микроэлементы: калий, фосфор, кальций, железо, магний, цинк, селен, марганец, бор, кобальт и др.
Из высших грибов выделены и в ряде случаев идентифицированы вещества, которые проявляют гиполипидемические, кардиотонические, противоопухолевые, антивирусные, антибактериальные, гепатопротекторные, иммуномодулирующие свойства. У лечебно-оздоровительных препаратов на основе медицинских грибов не выявлены побочные эффекты и токсическое действие.
В последние годы проявляется особый интерес к базидиальным грибам, как источникам новых эффективных и безопасных противоопухолевых природных веществ.
Противораковая активность обнаружена у активных веществ, выделенных из многих базидиомицетов (АВБ). По механизму действия базидиомицеты, обладающие противораковой активностью, можно разделить на две основные группы.
Первая объединяет вещества, непосредственно воздействующие на клетки злокачественных опухолей.
Вторую группу составляют соединения, которые осуществляют лечебный эффект опосредованно, стимулируя противораковый иммунитет.
К первой группе относятся синтезируемые базидиальными грибами гликаны, протеогликаны, терпеноиды, гаммапироны и др., способные подавлять развитие раковых клеток in vitro.
Вторую группу составляют иммунотерапевтические агенты, чье противоопухолевое действие базируется на усилении иммунных ответов. Подавляющее большинство соединений этой группы представлено полисахаридами, основным компонентом которых являются 1-3-бета-О-гликаны. Описаны также эффективные иммуностимуляторы иной химической природы, например, коньюгаты полисахаридов, пектины, белки и другие пептиды.
Механизм иммунотерапевтического действия АВБ основан на усилении различных иммунных ответов, обычно подавленных у онкологических больных, и реализуется путём активации макрофагов, увеличения активности Т-клеток, повышения уровня сывороточных факторов, а также с помощью минорных эффектов, приводящих к уменьшению токсичности химиотерапевтических средств. Показано, что иммуностимулирующее действие активных веществ базидиомицетов обусловлено неспецифической индукцией синтеза интерферона и активацией NK клеток-киллеров.
Антивирусная и канцеростатическая активности были выявлены у бета-О-глюканов, выделенных из плодовых тел и у водорастворимых лигно-гликопротеиновых комплексов, изолированных из автолизата глубинного мицелия.
Выявлены метаболиты базидиальных грибов с антиканцерогенной активностью, способные блокировать эффект ряда канцерогенов, в частности, N-бутил-1\1-бутанолнитрозоамина, а также обнаружено вещество с антимутагенной активностью, блокирующее образование N-нитрозосоединений. Выделены гуминоподобные биоантиоксиданты, обладающие выраженной антиканцерогенной активностью.
В ряде работ были предприняты попытки обобщить противораковые и иммуномодулирующие эффекты различных высших базидиомицетов, выявить их общие структурные и физико-химические свойства, ответственные за эти эффекты.
Так, ещё в 1999 г в обзоре [1] были проанализированы эффекты различных гликанов из базидиомицетов. Было показано, что 1-3-бета-О-гликаны, как в составе экстрактов, так и выделенные из них, в основном обеспечивают иммуномодулирующее и противоопухолевое действие. Однако, было отмечено, что, несмотря на структурную и функциональную схожесть гликанов из разных видов базидиомицетов, они различаются по эффективности действия на различные раковые опухоли и по способности индуцировать специфические клеточные реакции, в частности экспрессию и выработку цитокинов.
Специальное изучение противоопухолевых и иммуномодулирующих свойств полисахаридов из медицинских грибов (ПСГ) было выполнено в работе [2]. Было отмечено, что из 14000 известных видов грибов только незначительное число является источником новых перспективных фармацевтических веществ. Особенно важно для современной медицины, что эти виды представляют собой неограниченный источник уникальных веществ, обладающих противоопухолевым и иммуностимулирующим действием. Практически все базидиомицеты содержат большое количество биологически активных ПСГ в плодовых телах, но особенно высока их концентрация в мицелии. Эти ПСГ отличаются химической структурой, но все имеют 1-3-бета-гликановые группы в главной цепи и дополнительные 1-6-бета-гликановые группы в боковых цепях, которые необходимы для проявления их противоопухолевой активности. Для увеличения противораковой активности ПСГ перспективны различные методы химической модификации, в первую очередь, увеличивающие растворимость в воде и биодоступность.
В обзоре [3] обобщены противоопухолевые и иммуномодулирующие свойства различных базидиомицетов. Показано, что низкомолекулярные базидиомицеты обладают прямым действием на опухолевые клетки: индуцируют в них апоптоз, подавляют ангиогенез и метастазирование. Высокомолекулярные полисахариды и полисахаропептиды стимулируют иммунные реакции, усиливающие противоопухолевую активность. Отмечена также выраженная противоопухолевая активность селеносодержащих комплексов, обнаруженных в базидиомицетах.
В одной из последних работ [4] на культуре колоректального рака (SW 480) была специально исследована антипролиферативная активность 2-х фракций, выделенных из экстракта гриба Ganoderma lucidum (Рейши), препараты из которого традиционно используются в Китае и Японии в качестве противораковых средств. Фракция 1 содержала, в основном, полисахариды, а в состав фракции 2 входили только тритерпены. Было показано, что обе фракции существенно ингибируют пролиферацию клеток SW 480. При этом тритерпеновая фракция 2 оказывала большее антипролиферативное действие и, помимо этого, подавляла синтез ДНК и образование высокоактивных митогенных радикалов. В последние годы проведен ряд экспериментальных и клинических исследований, направленных на выявление механизмов антиканцерогенного и противоопухолевого действия веществ и препаратов, полученных из экстрактов плодовых тел и мицелия медицинских грибов. Эти исследования проведены в нескольких направлениях: оценка возможности монотерапии, увеличения эффективности и снижения токсичности противоопухолевой химиотерапии, а также ускорения реабилитации после химиотерапии.
В обзоре [5] представлены результаты многолетних наблюдений над репрезентативными выборками населения в Японии, в которых было показано, что длительное потребление продуктов из грибов существенно снижало частоту возникновения рака желудка.
В работе [6] представлены данные о том, что частота смертности от рака среди фермеров, выращивающих древесные грибы и постоянно потребляющих их в пищу, существенно ниже, чем у других сельскохозяйственных рабочих.
В исследовании [7] на культуре клеток гормоно-резистентного рака простаты (CD-3) было выявлено дозозависимое цитотоксическое действие бета-гликана из гриба Grifola frondoza (Мейтаки). При этом апоптоз индуцировался в 95% клеток при высоких дозах бета-гликана. Комбинация с цитостатиком кармустином позволила достигнуть 95% апоптоза при существенном снижении дозы бета-гликана и цитостатика. Сделан вывод, что бетагликан, даже в малых дозах, существенно сенсебилизирует раковые клетки к действию цитостатика, что позволяет рекомендовать его для комбинированной химиотерапии с целью снижения её доз и, соответственно, токсического действия.
В недавнем исследовании [8] была поставлена цель выяснить механизмы проапоптозного действия полисахаридов (ПСГ) из гриба Phellinus linteus (Санхван) и их комбинации с доксирубицином (ДР) на клетки гормоночувствительного рака простаты (LNCaP). Было показано, что ПСГ или ДР по отдельности в относительно низких дозах не индуцируют апоптоз в клетках опухоли. Однако, комбинация ПСГ и ДР в тех же низких дозах оказывает синергетический эффект, приводя к индукции апоптоза. При этом проапоптозное действие ПСГ реализуется путём активации клеточных каспаз. Авторы рекомендуют применение ПСГ в качестве модификаторов для повышения эффективности лекарственной терапии при раке простаты.
В работе [9] показано, что гликопротеин (ГП), выделенный из экстракта гриба Coriolus versicolor (Траметес), увеличивает дозозависимо апоптоз клеток лейкемии человека HL-60 в комбинации с доксирубицином и этопозидом. При этом клеточный цикл прерывается в S-фазе, а эффект отмечается при сниженных, не токсичных дозах цитостатиков. Отмечается, что препарат из экстракта Coriolus versicolor применяется клинически с успехом в Китае в составе комбинированной химиотерапии лейкемии.
Способность индуцировать апоптоз в различных культурах раковых клеток обнаружена у компонентов экстракта из гриба Albatrellus confluens [10]. При этом выявлена важная роль митохондриального цитохрома С в активации каспаз и других факторов индукции апоптоза.
Противоопухолевое действие бета- (1 -6)-0:-гликана (БГ), выделенного из гриба A. Blazei (Агарик бразильский), было изучено ин-витро и ин-виво в работе [11]. Показано, что БГ оказывает выраженный цитотоксический эффект на клетки человеческой культуры рака яичника, блокируя их пролиферацию и индуцируя апоптоз, путём активации проапоптических белков и каспаз митохондриальным цитохромом С. Отмечено подавление роста метастаз в лёгких и брюшной области при оральном введении БГ мышам с привитыми опухолями рака яичников и ракалёгких. Авторы делают вывод о перспективности применения БГ из высших грибов для лечения больных с диссеминированным и метастатическим раком.
В настоящее время считается, что одним из важнейших механизмов противоопухолевого и антиметастатического действия различных веществ является их антиангиогенное действие. В работе [12] изучали влияние полисахаропептида (ПСП), выделенного из гриба Coriolus versicolог (Траметес) на ангиогенез в опухоли S180 у мышей. Было показано, что у мышей, получавших ПСП, плотность сосудов в опухоли была существенно меньше, чем в контроле. Этому соответствовало подавление экспрессии эндотелиального фактора роста и значительное уменьшение размера и массы опухоли. Сделан вывод, что подавление ангиогенеза является одним из важных механизмов противоопухолевого действия ПСП.
Важная роль активации иммунных реакций в обеспечении противоопухолевого действия бета-гликанов из медицинских грибов на организменном уровне была продемонстрирована в работе [13]. В эксперименте на животных с привитой карциномой было показано, что D-фракция бета-гликана из плодовых тел гриба Grifola frondosa (Мейтаке) снижает повышенную активность В-клеток и потенцирует активацию Т — хелперов, усиливая клеточный компонент иммунной реакции. При этом индуцируется продукция у-интерферона, интерлейкинов IL-12 и IL-18, но подавляется продукция IL-4. Это сопровождается подавлением роста опухоли и метастазирования.
Особый интерес представляет исследование [14], в котором изучена возможность гемопоэтического действия 1,3-бета-0-гликана из гриба Sparassis crispa (БГС) на модели лейкопении у мышей, вызванной введением циклофосфана. Показано, что оральное введение БГС приводит к увеличению числа моноцитов, гранулоцитов и веса селезёнки по сравнению с контролем. Этот эффект усиливался при совместном применении с другими гемопоэтическими препаратами. Рекомендовано применение бета-гликанов для реабилитации онкологических больных после химиотерапии.
В обзоре [15] проанализированы противоопухолевые и иммуномодулирующие свойства полисахаридов и полисахаридпептидных комплексов различных базидиомицетов. Отмечается сходство противоопухолевых и иммуномодулирующих механизмов действия этих веществ. Подчёркивается, что они индуцируют активность иммуномодулирующих цитокинов и их рецепторов, способствуя нормализации различных патологических состояний, в том числе при канцерогенезе.
Клинические исследования противоопухолевого действия экстрактов из базидиомицетов относительно ограничены.
В обзоре [16] обобщены результаты лечения больных различными видами рака (2-4 степени) препаратом, содержащим бета-1,6-гликан из гриба Мейтаке. Регресс опухолей и/или значительное улучшение симптомов наблюдали у 58,3% больных раком печени, у 68,8% больных раком молочной железы и у 62,5% больных раком легких. В то же время улучшение отметили только у 10 — 20% больных лейкемией, раком желудка и опухолями мозга. Применение препарата в комбинации с химиотерапией улучшало эффективность лечения в 1,2 — 1,4 раза. Кроме того, у этих больных отмечали существенно меньшее подавление иммунитета.
В работе [17] отмечается, что противоопухолевые препараты на основе полисахаридного (ПСК) и пептидно-полисахаридного (ПСП) комплексов из гриба Coriolus versicolor (Траметес) клинически более эффективны, чем препараты Лентинан (Lentinus edodes Шиитаке) и Сонифиллан (Schizophyllum commune). В клинических исследованиях, проведенных в Японии, начиная с 1970 г., было показано, что длительный приём ПСК существенно увеличивал 5-летнюю и более выживаемость больных раком пищевода, желудка, прямой кишки, гортани, лёгких и рака молочной железы. Клинические испытания 2 и 3 фаз лекарственного препарата на основе ПСП были выполнены в Китае. В этих рандомизированных исследованиях, проведенных под двойным слепым контролем, показано, что лечение ПСП значительно увеличивало 5-летнюю выживаемость больных раком пищевода. Кроме того, приём ПСП существенно улучшал качество жизни, обеспечивал стойкий обезболивающий эффект и повышал иммунный статусу 70-97% больных раком желудка, пищевода, лёгких, яичников и шейки матки. Было показано, что как ПСК, так и ПСП повышали количество иммунекомпетентных клеток, увеличивали инфильтрацию опухолей цитотоксичными Т-клетками и предотвращали развитие побочных эффектов химиотерапии. Отмечена хорошая переносимость препаратов, их совместимость с химио — и лучевой терапией.
Данные исследований коммерческого препарата Лингши на основе экстракта из гриба Ganoderma lucidum (Рейши) были обобщены в обзоре [18]. В исследованиях ин-витро было выявлено прямое цитостатическое и антиангиогенное действие препарата. В 2-х рандомизированных и 1-м не рандомизированном клинических исследованиях показано, что приём препарата улучшал качество жизни у 65% больных раком и существенно повышал у них реакции клеточного иммунитета.
Несмотря на сходство противоопухолевых механизмов действия и однонаправленность эффектов АВБ из различных видов базидиомицетов, их активности значительно отличаются, как качественно, так и количественно. Поэтому в одной последних работ [19] было проведено сравнительное исследование противоопухолевой активности экстрактов из 20 видов наиболее известных базидиомицетов на культуре клеток гормоно-резистентного рака простаты (РС-3). Показано, что водорастворимый экстракт из гриба Pleurotus ostreatus — вешенка (РОЭ) оказывал наиболее выраженное цитостатическое действие на опухолевые клетки по сравнению с экстрактами из всех остальных видов грибов. При этом РОЭ быстро индуцировал апоптоз в клетках опухоли РС-3 при концентрации 150 мкг/мл и экспозиции в течение 2 часов. Экспозиция опухолевых клеток в течение 6 часов с РОЭ в концентрации 200 мкг/мл приводила к разрыву участков ДНК и полной остановке клеточного деления. При этом как цитотоксическое действие, так и способность индуцировать апоптоз были дозозависимыми. Было показано, что колонийобразующая способность опухолевых клеток снижалась от 100% до 4,5% и 0,5% при концентрациях РОЭ, равных 60 мкг/мл и 120 мкг/мл, соответственно. Противоопухолевая активность РОЭ существенно зависела от температуры в процессе экстракции: она полностью исчезала при экспозиции в течение 2 часов при температуре 80 С° и сохранялась при длительной экспозиции при температуре 40 С. Была идентифицирована наиболее активная фракция экстракта Pleurotus ostreatus — РОЭ-Ф2, также чувствительная к тепловой обработке. Полученные данные, а также анализ физико-химических характеристик РОЭ-Ф2 позволил предположить, что активным компонентом экстракта Pleurotus ostreatus является водорастворимый полипептид.
В исследовании [20], проведенном на мышах, было выявлено протекторное действие экстракта Pleurotus ostreatus (ЭПО) на индукцию карциномы мочевого пузыря в ответ на введение карциногена (N-butyl-N’-butanolnitrosoamine). При этом показано, что активность макрофагов, лейкоцитов и цитотоксическая реакция NK лимфоцитов против опухолевых клеток были подавлены у мышей, получавших только канцероген. С другой стороны, у мышей, получавших канцероген и ЭПО, активность этих клеток оставалась на уровне нормы.
В работе [21]изучали протекторное действие высушенного порошка Pleurotus ostreatus (ППО) на рак прямой кишки, индуцированный введением карциногена dimethylhydrazine (DMH), у крыс самцов. Введение ППО совместно с DMH приводило к значительному снижению числа опухолей, гиперпла-зированных лимфоузлов и атипичных клеток. При этом отмечено подавление активности тканевых онкомаркёров в прямой кишке и печени.
Влияние экстракта Pleurotus ostreatus (ЭПО) на апоптоз, пролиферативный клеточно-ядерный антиген (ПКЯА) и белок р53 исследовано при индукции рака прямой кишки у крыс канцерогеном — dimethylhydrazine (DMH). Введение ЭПО совместно с DMH приводило к существенному снижению частоты возникновения раковых опухолей. При этом у крыс, получавших корм с ЭПО, отмечено существенное повышение в тканях индекса апоптоза, содержания р53 и снижение ПКЯА [22].
Исследования, проведенные в последние годы, были посвящены изучению механизмов противоопухолевого действия экстрактов из Pleurotus ostreatus, а также идентификации активных веществ, вызывающих этот эффект.
В работе [23] изучали антипролиферативное и проапоптическое действие водорастворимой фракции экстракта из глубиннокультивируемого мицелия Pleurotus ostreatus (ЭМПО) на культуре клеток НТ-29 рака прямой кишки. Показано, что ЭМПО подавлял дозозависимо пролиферацию опухолевых клеток вследствие индукции в нихапоптоза. При этом выявили активацию проапоптозного белка Вахи цитозольного цитохрома-с. Был выделен и охарактеризован основной активный компонент ЭМПО в виде низкомолекулярного полисахарида альфа-гликана. Сделан вывод, что основным механизмом антипролиферативного действия ЭМПО является индукция программируемой смерти в опухолевых клетках.
В другом исследовании [24] было обнаружено противоопухолевое и иммуномодулирующее действие ЭМПО, содержащего три нейтральных фракции протеогликанов, отличающихся соотношением полисахарид/белок: 14,2; 18,3 и 26,4, соответственно. Эти фракции тестировали инвиво на мышах с привитой опухолью (Sarcoma-180). Было выявлено выраженное противоопухолевое действие всех фракций ЭМПО, заключающееся в существенном снижении числа опухолевых клеток. Показано, что у большинства клеток опухоли цикл деления прерывался в пре-С (0)/ (С1)фазе. Все три фракции существенно увеличивали цитотоксическое действие NK клеток и стимулировали выработку N0 макрофагами. Было рекомендовано применение ЭМПО в качестве противоопухолевого и иммуномодулирующего комплекса.
В работе [25] исследовали противоопухолевое действие высокомолекулярного лектина с молекулярным весом 40-41 кДа, выделенного из плодовых тел гриба Pleurotus ostreatus (ЛПО). Выявлено потенциальное противоопухолевое действие ЛПО на мышах с привитыми опухолями (саркома S-180 и гепатома Н-22). Однако, ЛПО обладал существенным гемагглютенирующим действием.
В отдельном исследовании [26] было показано иммуномодулирущее и противоопухолевое действие ДНК, выделенной из плодовых тел гриба Pleurotus ostreatus (ДПО). Введение ДПО мышам с привитой саркомой Эр-лиха приводило к существенному увеличению их выживаемости. При этом отмечали выраженное повышение цитотоксической активности NK клеток.
Выше были рассмотрены примеры противоопухолевых эффектов водных экстрактов из плодовых тел и мицелиев грибов или выделенных из них b-гликанов и лектинов.
Значительно меньше информации об экстрактах другого вида. На практике применяются два полярных подхода к получению экстрактов.
В первом из них экстрагирование ведется в водных средах при варьировании рН. В этом варианте в экстракт переходят полимерные вещества — белки и полисахариды (b-гликаны, пищевые некрахмалистые волокна).
Вторая схема экстрагирования заключается в использовании различных органических растворителей, как экстрагентов: этанола, метанола, этилацетата и т. д. В этом случае ни белки, ни полисахариды в экстракт не переходят. Следовательно, действующее начало в таких экстрактах принадлежит широкому спектру низкомолекулярных соединений, часть из которых идентифицирована.
Так, антиоксидантной и гиполипидемической активностью обладают метанольные и этилацетатные экстракты из P. Citrinoplleatus [27]. Большинство антиоксидантных веществ базидиомицетов переходят в метанольный экстракт [31]. Главными компонентами таких экстрактов являются эргостерины и никотиновая кислота. Эти же экстракты оказывают ингибирующий эффект на тумор-индуцированную неоваскуляризацию и блокирование иммунного подавления, индуцированного опухолью [28].
Из Ganoderma lucidom (Рейши) выделены производные стильбена — ресвератрол и его димер — каззиагрол, которые обладают антиметастатической активностью [29].
Антираковыми эффектами обладают фракции полифенолов [30]. Эллаготаннины и гидролизируемые танины в экстрактах органических растворителей из базидиомицетов ингибируют туморогенез, например, почек у CD-1 мышей [32].
Сравнение водных и этанольных экстрактов гриба Ganoderma lucidus показало, что оба эктракта индуцируют апоптоз в MCF-7 — линии раковых клеток. Такие же антираковые свойства наблюдали у водной фракции, переосажденной этанолом.
В целом, по-видимому, ясно, что круг наиболее активных соединений из базидиомицетов достаточно широк.
Антираковые эффекты на клеточном уровне, по-видимому, опосредуются индукцией апоптоза, однако, мишени для разных экстрактов могут быть различными.
Нельзя исключить и возможность сложного экспериментального артефакта, трактуемого как «синергизм» действия разнонаправленных биологически активных соединений.
В этой связи любопытен пример с эпикатехином. Этот представитель класса таннинов эффективен против диабета и ряда опухолей. Таннины известны в качестве активных комплексообразователей. В клетках (и, по-видимому, в водных лизатах) они эффективно связываются с белками и полисахаридами, используя различные варианты связей:

1. водородные связи между фенольными гидроксильными группами таннинов и свободными аминокислотами белков, или гидроксильными и кар боксильными группами полисахаридов;
2. ионные связи между анионными группами таннинов и катионными группа ми белков;
3. смешанные соли с другими полимерами с участием ионов двухвалентных металлов (Са2+);
4. ковалентными связями через хиноновые группы таннинов и соответству ющие группы в молекулах полимеров.

В целом, это может снять противоречие между данными о свойствах водных и спиртовых экстрактов. В этом смысле, в водных экстрактах мы наблюдаем синергизм эффектов двух и более агентов.
Таким образом, анализ данных литературы позволяет представить основной механизм противоопухолевого действия активных веществ из медицинских грибов, заключающийся как в прямом цитотоксическом действии на клетки опухоли, в том числе за счёт индукции апоптоза, так и опосредованно путём стимуляции противоопухолевого иммунитета.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Borchers AT, Stern JS, Hackman RM, Keen CL, Gershwin ME. Mushrooms, tumors, and immunity. Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1999, Sep; 221 (4): 281-93.
2. Wasser SP. Medicinal mushrooms as a source of antitumor and immunomodulating polysaccharides. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002, Nov; 60 (3): 58-74.
3. Zaidman BZ, Yassin M, Mahajna J, Wasser SP. Medicinal mushroom modulators of molecular targets as cancer therapeutics. Appl. Microbiol. Biotechnol. 2005, Jun; 67 (4): 453-68.
4. Xie JT, Wang CZ, Wicks S, Yin JJ, Kong J, Li J, Li YC, Yuan CS. Ganoderma lucidum extract inhibits proliferation of SW 480 human colorectal cancer cells. Exp. Oncol. 2006, Mar; 28 (1): 25-9.
5. Нага M, Hanaoka T, Kobayashi M, Otani T, Adachi HY, Montani A, Natsukawa S, ShauraK, KoizumiY, KasugaY, MatsuzawaT, IkekawaT, Sasaki S, TsuganeS. Cruciferous vegetables, mushrooms, and gastrointestinal cancer risks in a multicenter, hospital-based case-control study in Japan. Nutr. Cancer, 2003; 46 (2): 138-47.
6. Monro JA.Treatment of cancer with mushroom products. Arch Environ Health. 2003Aug;58 (8):533-7.
7. Fullerton SA, Samadi AA, Tortorelis DG, Choudhury MS, Mallouh C, Tazaki H, Konno S. Induction of apoptosis in human prostatic cancer cells with beta-glucan (Maitake mushroom polysaccharide). MolUrol. 2000. Spring; 4 (1): 7-13.
8. Collins L, Zhu T, Guo J, Xiao ZJ, Chen CY. Phellinus linteus sensitises apoptosis induced by doxorubicin in prostate cancer. Br J Cancer. 2006. Aug. 7; 95 (3): 282-8. Epub. 2006 Jul. 25.
9. Hui KP, Sit WH, Wan JM Induction of S phase cell arrest and caspase activation by polysaccharide peptide isolated from Coriolus versicolor enhanced the cell cycle dependent activity and apoptotic cell death of doxorubicin and etoposide, but not cytarabine in HL-60 cells. Oncol. Rep. 2005. Jul;14 (1): 145-55.
10. Ye M, Liu JK, Lu ZX, Zhao Y, Liu SF, Li LL, Tan M, Weng XX, Li W, Cao Y. Grifolin, a potential antitumor natural product from the mushroom Albatrellus confluens, inhibits tumor cell growth by inducing apoptosis in vitro. FEBS Lett. 2005. Jun. 20; 579 (16): 3437-43.
11. Kobayashi H, Yoshida R, Kanada Y, Fukuda Y, Yagyu T, Inagaki K, Kondo T, Kurita N, Suzuki M, Kanayama N, Terao T. Suppressing effects of daily oral supplementation of beta-glucan extracted from Agaricus blazei Murill on spontaneous and peritoneal disseminated metastasis in mouse model. J
    Cancer Res. Clin. Oncol. 2005 Aug;131 (8):527-38. Epub 2005 May 10.
12. Ho JC, Konerding MA, Gaumann A, Groth M, Liu WK. Fungal polysaccharopeptide inhibits tumor angiogenesis and tumor growth in mice. Life Sci. 2004, Jul. 30; 75 (11): 1343-56.
13. Inoue A, Kodama N, Nanba H. Effect of maitake (Grifola frondosa) D-fraction on the control of the T lymph node Th-1/Th-2 proportion. Biol Pharm Bull. 2002, Apr;25 (4):536-40.
14. HaradaT, MasudaS, Arii M, AdachiY, NakajimaM, YadomaeT, Ohno N. Soy isoflavone aglycone modulates a hematopoietic response in combination with soluble beta-glucan: SCG. Biol. Pharm. Bull. 2005, Dec;28 (12):2342-5.
15. Ooi VE,  Liu  F. Immunomodulation and anti-cancer activity of polysaccharide-protein complexes. Curr. Med. Chem. 2000 Jul;7 (7):715-29.
16. Kodama N, Komuta K, Nanba H. Can maitake MD-fraction aid cancer patients? Altern. Med. Rev. 2002 Jun;7 (3):236-49.
17. Kidd PM. The use of mushroom glucans and proteoglycans in cancer treatment. Altern. Med. Rev. 2000, Feb; 5 (1): 4-27.
18. Yuen JW, Gohel MD. Anticancer effects of Ganoderma lucidum: a review of scientific evidence. Nutr. Cancer. 2005; 53 (1): 11-7.
19. Gu YH, Sivam G. Cytotoxic effect of oyster mushroom Pleurotus ostreatus on human androgen-independent prostate cancer PC-3 cells. J Med Food. 2006 Summer;9 (2):196-204.
20. Kurashige S, Akuzawa Y, Endo F. Effects of Lentinus edodes, Grifola frondosa and Pleurotus ostreatus administration on cancer outbreak, and ctivitiesofmacrophagesandlymphocytesinmicetreatedwithacarcinogen, N-butyl-N-butanolnitrosoamine. Immunopharmacol. Immunotoxicol. 1997, May; 19 (2): 175-83.
21. Bobek P, Galbavy S, Ozdin L. Effect of oyster mushroom (Pleurotus ostreatus) on pathological changes in dimethylhydrazine-induced rat colon cancer. Oncol. Rep. 1998, May-Jun; 5 (3): 727-30.
22. Zusman I, Reifen R, Livni O, Smirnoff P, Gurevich P, Sandler B, Nyska A, Gal R, Tendler Y, Madar Z. Role of apoptosis, proliferating cell nuclear antigen and p53 protein in chemically induced colon cancer in rats fed corncob fiber treated with the fungus Pleurotus ostreatus. Anticancer Res. 1997, May-un;17 (3C): 2105-13.
23. Lavi I, Friesem D, Geresh S, Hadar Y, Schwartz B. An aqueous polysaccharide extract from the edible mushroom Pleurotus ostreatus induces anti-proliferative and pro-apoptotic effects on HT-29 colon cancer cells. Cancer Lett. 2006, Nov. 28; 244 (1): 61 -70.
24. Sarangi I, Ghosh D, Bhutia SK, Mallick SK, Maiti TK. Anti-tumor and immunomodulating effects of Pleurotus ostreatus mycelia-derived Proteoglycans. Int. Immunopharmacol. 2006, Aug; 6 (8): 1287-97.
25. Wang H, Gao J, Ng TB. A new lectin with highly potent antihepatoma and antisarcoma activities from the oyster mushroom Pleurotus ostreatus. Biochem Biophys Res Commun. 2000, Sep 7; 275 (3): 810-6.
26. Shlyakhovenko V, Kosak V, Olishevsky S. Application of DNA from mushroom Pleurotus ostreatus for cancer biotherapy: a pilot Study. Exp Oncol. 2006, Jun; 28 (2): 132-5.
27. Hu SH, Liang ZC, Chia YC, Lien JL, Chen KS, Lee MY, Wang YC Antihyperlipidemic and antioxidant effects of extracts from Pleurotus citrinopileatus. J Agric Food Chem 2005, 54 (6) 2103-10
28. Kimura Y. New anticancer agents: in vitro and in vivo evaluation of the antitumor and antimetastatic actions of various compounds isolated from medicinal plants. In Vivo. 2005, 19 (1)37-60.
29. Shubert SY, Lansky EP, Neeman I. Antioxidant and eicosanoid enzyme inhibition propertiesof pomegranate seedoil and fermented juice flavonoids. J Ethnopharmacol. 1999,66 (1)11-7.
30. Lansky EP, Shubert SY, Neeman I. Pharmacological and therapeu ti c propertiesof pomegranate in Giheam-Opti on s. Mediterreneannes, 2005, 231 — 325.
31. Afaq F, Saleem M, Krueger CG, Reed JD, Mukhtar H. Anthocyanin-and hydrolysable tannin-rich pomegranate fruit extract modulates MAPK And NF-kappaB pathways and inhibits skin tumorigenesis in CD-1 mice. Int J Cancer, 2005. 113 (3)423-33.
32. Hu H, Ahn NS, Yang X, Lee YS, Kang KS. Ganoderma lucidum extract induces cell cycle arrest and apoptosis in MCF-7 human breast cancer cell. Int J Cancer. 2002, 102 (3) 250-3.